We visualized a dynamic process of fatty acid uptake of brown adipocytes using a time-lapse ultra-broadband multiplex coherent anti-Stokes Raman scattering (CARS) spectroscopic imaging system with an onstage incubator. Combined with the deuterium labeling technique, the intracellular uptake of saturated fatty acids was traced up to 9 h, a substantial advance over the initial multiplex CARS system, with an analysis time of 80 min. Characteristic metabolic activities of brown adipocytes, such as resistance to lipid saturation, were elucidated, supporting the utility of the newly developed system.

1.
L. K.
Summers
,
S. C.
Barnes
,
B. A.
Fielding
,
C.
Beysen
,
V.
Ilic
,
S. M.
Humphreys
, and
K. N.
Frayn
,
Am. J. Clin. Nutr.
71
(
6
),
1470
1477
(
2000
).
2.
B. T.
McNeill
,
N. M.
Morton
, and
R. H.
Stimson
,
Front. Endocrinol.
11
(
785
),
571659
(
2020
).
3.
A. B.
Shinde
,
A.
Song
, and
Q. A.
Wang
,
Front. Endocrinol.
12
(
333
),
651763
(
2021
).
4.
F.
Cutrale
,
V.
Trivedi
,
L. A.
Trinh
,
C.-L.
Chiu
,
J. M.
Choi
,
M. S.
Artiga
, and
S. E.
Fraser
,
Nat. Methods
14
(
2
),
149
152
(
2017
).
5.
H.-J.
van Manen
,
Y. M.
Kraan
,
D.
Roos
, and
C.
Otto
,
Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.
102
(
29
),
10159
10164
(
2005
).
6.
V. V.
Pully
,
A. T. M.
Lenferink
, and
C.
Otto
,
J. Raman Spectrosc.
42
(
2
),
167
173
(
2011
).
7.
C.-K.
Huang
,
H.
Hamaguchi
, and
S.
Shigeto
,
Chem. Commun.
47
(
33
),
9423
9425
(
2011
).
8.
M.
Okada
,
N. I.
Smith
,
A. F.
Palonpon
,
H.
Endo
,
S.
Kawata
,
M.
Sodeoka
, and
K.
Fujita
,
Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.
109
(
1
),
28
32
(
2012
).
9.
T.
Ichimura
,
L. D.
Chiu
,
K.
Fujita
,
S.
Kawata
,
T. M.
Watanabe
,
T.
Yanagida
, and
H.
Fujita
,
PLoS One
9
(
1
),
e84478
(
2014
).
10.
L. B.
Kong
,
P.
Setlow
, and
Y. Q.
Li
,
J. Biomed. Opt.
19
(
1
),
011003
(
2014
).
11.
A.
Hashimoto
,
Y.
Yamaguchi
,
L. D.
Chiu
,
C.
Morimoto
,
K.
Fujita
,
M.
Takedachi
,
S.
Kawata
,
S.
Murakami
, and
E.
Tamiya
,
Sci. Rep.
5
,
12529
(
2015
).
12.
M.
Yasuda
,
N.
Takeshita
, and
S.
Shigeto
,
Sci. Rep.
11
(
1
),
1279
(
2021
).
13.
M. D.
Duncan
,
J.
Reintjes
, and
T. J.
Manuccia
,
Opt. Lett.
7
(
8
),
350
(
1982
).
14.
A.
Zumbusch
,
G. R.
Holtom
, and
X. S.
Xie
,
Phys. Rev. Lett.
82
(
20
),
4142
4145
(
1999
).
15.
M.
Hashimoto
,
T.
Araki
, and
S.
Kawata
,
Opt. Lett.
25
(
24
),
1768
1770
(
2000
).
16.
C. W.
Freudiger
,
W.
Min
,
B. G.
Saar
,
S.
Lu
,
G. R.
Holtom
,
C.
He
,
J. C.
Tsai
,
J. X.
Kang
, and
X. S.
Xie
,
Science
322
(
5909
),
1857
1861
(
2008
).
17.
C. L.
Evans
and
X. S.
Xie
,
Annu. Rev. Anal. Chem.
1
,
883
909
(
2008
).
18.
W.
Min
,
C. W.
Freudiger
,
S.
Lu
, and
X. S.
Xie
,
Annu. Rev. Phys. Chem.
62
,
507
530
(
2011
).
19.
Y.
Ozeki
,
W.
Umemura
,
Y.
Otsuka
,
S.
Satoh
,
H.
Hashimoto
,
K.
Sumimura
,
N.
Nishizawa
,
K.
Fukui
, and
K.
Itoh
,
Nat. Photonics
6
(
12
),
845
851
(
2012
).
20.
C. H.
Camp
, Jr.
and
M. T.
Cicerone
,
Nat. Photonics
9
,
295
(
2015
).
21.
M.
Cicerone
,
Curr. Opin. Chem. Biol.
33
,
179
185
(
2016
).
22.
L.
Wei
,
Z.
Chen
,
L.
Shi
,
R.
Long
,
A. V.
Anzalone
,
L.
Zhang
,
F.
Hu
,
R.
Yuste
,
V. W.
Cornish
, and
W.
Min
,
Nature
544
,
465
(
2017
).
23.
G. I.
Petrov
,
R.
Arora
,
V. V.
Yakovlev
,
X.
Wang
,
A. V.
Sokolov
, and
M. O.
Scully
,
Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.
104
(
19
),
7776
7779
(
2007
).
24.
X.
Nan
,
J.-X.
Cheng
, and
X. S.
Xie
,
J. Lipid Res.
44
(
11
),
2202
2208
(
2003
).
25.
X.
Nan
,
E. O.
Potma
, and
X. S.
Xie
,
Biophys. J.
91
(
2
),
728
735
(
2006
).
26.
H.
Kano
and
H.
Hamaguchi
,
Anal. Chem.
79
(
23
),
8967
8973
(
2007
).
27.
I. W.
Schie
,
J.
Wu
,
T.
Weeks
,
M. A.
Zern
,
J. C.
Rutledge
, and
T.
Huser
,
J. Biophotonics
4
(
6
),
425
434
(
2011
).
28.
Y. Z.
Shi
,
D. L.
Zhang
,
T. B.
Huff
,
X. F.
Wang
,
R. Y.
Shi
,
X. M.
Xu
, and
J. X.
Cheng
,
J. Biomed. Opt.
16
(
10
),
106012
(
2011
).
29.
W.
Dou
,
D.
Zhang
,
Y.
Jung
,
J.-X.
Cheng
, and
D. M.
Umulis
,
Biophys. J.
102
(
7
),
1666
1675
(
2012
).
30.
C.
Jüngst
,
M.
Klein
, and
A.
Zumbusch
,
J. Lipid Res.
54
(
12
),
3419
3429
(
2013
).
31.
C.
Jüngst
,
M. J.
Winterhalder
, and
A.
Zumbusch
,
J. Biophotonics
4
(
6
),
435
441
(
2011
).
32.
X.
Li
,
Y.
Li
,
M.
Jiang
,
W.
Wu
,
S.
He
,
C.
Chen
,
Z.
Qin
,
B. Z.
Tang
,
H. Y.
Mak
, and
J. Y.
Qu
,
Anal. Chem.
91
(
3
),
2279
2287
(
2019
).
33.
A.
Colombini
,
E.
Ragni
,
L.
Mortati
,
F.
Libonati
,
C. P.
Orfei
,
M.
Vigano
,
M.
Brayda-Bruno
, and
L.
de Girolamo
,
Cells
10
(
5
),
1180
(
2021
).
34.
L.
Wei
,
Y.
Shen
,
F.
Xu
,
F.
Hu
,
J. K.
Harrington
,
K. L.
Targoff
, and
W.
Min
,
ACS Chem. Biol.
10
(
3
),
901
908
(
2015
).
35.
S. J.
Jo
,
W. W.
Choi
,
E. S.
Lee
,
J. Y.
Lee
,
H. S.
Park
,
D. W.
Moon
,
H. C.
Eun
, and
J. H.
Chung
,
Lipids
46
(
6
),
487
494
(
2011
).
36.
T.
Hashimoto
,
H.
Segawa
,
M.
Okuno
,
H.
Kano
,
H.
Hamaguchi
,
T.
Haraguchi
,
Y.
Hiraoka
,
S.
Hasui
,
T.
Yamaguchi
,
F.
Hirose
, and
T.
Osumi
,
J. Cell Sci.
125
(
24
),
6127
6136
(
2012
).
37.
L.
Shi
,
C.
Zheng
,
Y.
Shen
,
Z.
Chen
,
E. S.
Silveira
,
L.
Zhang
,
M.
Wei
,
C.
Liu
,
C.
de Sena-Tomas
,
K.
Targoff
, and
W.
Min
,
Nat. Commun.
9
(
1
),
2995
(
2018
).
38.
T.
Akiyama
,
A.
Inoko
,
Y.
Kaji
,
S.
Yonemura
,
K.
Kakiguchi
,
H.
Segawa
,
K.
Ishitsuka
,
M.
Yoshida
,
O.
Numata
,
P.
Leproux
,
V.
Couderc
,
T.
Oshika
, and
H.
Kano
,
Sci. Rep.
7
,
39967
(
2017
).
39.
E. M.
Vartiainen
,
H. A.
Rinia
,
M.
Müller
, and
M.
Bonn
,
Opt. Express
14
,
3622
3630
(
2006
).
40.
Y.
Irie
,
A.
Asano
,
X.
Cañas
,
H.
Nikami
,
S.-i.
Aizawa
, and
M.
Saito
,
Biochem. Biophys. Res. Commun.
255
(
2
),
221
225
(
1999
).
41.
H.
Yoneyama
,
K.
Sudo
,
P.
Leproux
,
V.
Couderc
,
A.
Inoko
, and
H.
Kano
,
APL Photonics
3
(
9
),
092408
(
2018
).
42.
B. P.
Gaber
,
P.
Yager
, and
W. L.
Peticolas
,
Biophys. J.
22
(
2
),
191
207
(
1978
).
43.
C.
Matthäus
,
G.
Bergner
,
C.
Krafft
,
B.
Dietzek
,
S.
Lorkowski
, and
J.
Popp
,
Proc. SPIE
7715
,
771511
(
2010
).
44.
H. A.
Rinia
,
K. N. J.
Burger
,
M.
Bonn
, and
M.
Müller
,
Biophys. J.
95
(
10
),
4908
4914
(
2008
).
45.
C.
Matthäus
,
C.
Krafft
,
B.
Dietzek
,
B. R.
Brehm
,
S.
Lorkowski
, and
J.
Popp
,
Anal. Chem.
84
(
20
),
8549
8556
(
2012
).
46.
M. N.
Slipchenko
,
T. T.
Le
,
H.
Chen
, and
J.-X.
Cheng
,
J. Phys. Chem. B
113
(
21
),
7681
7686
(
2009
).

Supplementary Material

You do not currently have access to this content.